Edman降解测序的试剂及其基本原理是什么-每日热文
2023-04-10 16:54:05
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Edman降解法是蛋白质N末端序列分析的经典方法，其利用一系列化学反应每次从肽链上切下一个氨基酸并进行鉴定，如此循环以完成N末端氨基酸的序列测定。
Edman降解法主要用到的试剂为异硫氰酸苯酯（PITC），PITC能与蛋白质多肽的N末端氨基酸残基发生偶联反应生成苯氨基硫甲酰衍生物（PTC-肽），在三氟乙酸处理下，N末端氨基酸的肽键被选择性的切断，释放出含有该末端氨基酸的噻唑啉酮苯胺（ATZ）衍生物，ATZ-衍生物不稳定，在酸性条件下可转化为稳定的苯乙内酰硫脲（PTH）衍生物，即PTH氨基酸。至此，就获得了蛋白质N末端的第一个氨基酸，将缺少了一个氨基酸的蛋白质多肽进行回收重复进行以上反应，并对切割下来的氨基酸进行鉴定，如此循环，直到完成N末端氨基端的序列测定。
百泰派克公司采用岛津公司Edman测序系统，为广大科研工作者和科研客户提供基于Edman的N端测序服务技术包裹，可对纯化后蛋白产物、抗体以及蛋白疫苗的N末端氨基酸序列进行准确测定。此外，百泰派克生物科技也建立了以先进的LC-MS/MS技术进行N-端测序的平台，可以测出封闭和修饰的蛋白质末端，与Edman降解法形成互补，保证N端测序服务的顺利进行。
